V oblasti molekulárnej biológie je presná kvantifikácia RNA prvoradá. RNA je kľúčovým hráčom v mnohých biologických procesoch vrátane génovej expresie, regulácie a syntézy proteínov. Súprava izotermálnej amplifikácie RNA sa ukázala ako výkonný nástroj pre výskumných pracovníkov na detekciu a kvantifikáciu molekúl RNA. Ako dodávateľ súprav na izotermálne amplifikačné súpravy RNA sa ma často pýtajú na presnosť týchto súprav. V tomto blogovom príspevku sa ponorím do faktorov, ktoré ovplyvňujú presnosť kvantitatívnej analýzy pomocou súpravy na izotermálnu zosilňovaciu súpravu RNA, a diskutujem o tom, ako naše výrobky v tomto ohľade vynikajú.
Pochopenie Izotermálneho zosilnenia RNA
Predtým, ako preskúmame presnosť kvantitatívnej analýzy, je nevyhnutné pochopiť zásadu izotermálnej amplifikácie RNA. Na rozdiel od tradičnej polymerázovej reťazovej reakcie (PCR), ktorá vyžaduje zmeny cyklickej teploty, sa pri konštantnej teplote vyskytuje izotermická amplifikácia. To zjednodušuje experimentálne nastavenie a znižuje čas potrebný na amplifikáciu. Súprava na izotermálnu amplifikáciu RNA typicky používa enzýmy, ako je reverzná transkriptáza a DNA polymeráza, na prevod RNA na komplementárnu DNA (cDNA) a potom amplifikovať cDNA.
Faktory ovplyvňujúce presnosť kvantitatívnej analýzy
Niekoľko faktorov môže ovplyvniť presnosť kvantitatívnej analýzy pomocou súpravy Izotermálnej amplifikácie RNA. Pozrime sa bližšie na tieto faktory:
1. Kvalita vzorky
Kvalita vzorky RNA je rozhodujúca pre presnú kvantifikáciu. Kontaminanty, ako je genomická DNA, proteíny a organické rozpúšťadlá, môžu interferovať s procesom amplifikácie a viesť k nepresným výsledkom. Preto je nevyhnutné zabezpečiť, aby bola vzorka RNA čistá a bez kontaminantov. Naše súpravy na izotermálnu amplifikáciu RNA sú navrhnuté tak, aby boli robustné proti menším kontaminantom, ale pre najlepšie výsledky odporúčame používať vysokokvalitné vzorky RNA.
2. Návrh základov
Priméry sú krátke sekvencie DNA, ktoré sa viažu na špecifické oblasti cieľovej RNA. Návrh primérov môže významne ovplyvniť presnosť zosilnenia. Priméry by mali byť špecifické pre cieľovú sekvenciu RNA, aby sa predišlo ne -špecifickej amplifikácii. Okrem toho by sa teplota topenia (TM) primérov mala optimalizovať, aby sa zabezpečila účinná väzba a amplifikácia. Náš výskumný a vývojový tím starostlivo navrhol priméry pre našeMira RNA izotermálna rýchla amplifikačná súprava fluorescencia -iiaMIRA RNA izotermálna rýchla amplifikačná súprava BASIC -IIzabezpečiť vysokú špecifickosť a efektívnosť.
3. Enzýmová aktivita
Enzýmy použité v súprave izotermálnej amplifikačnej súpravy RNA, ako je reverzná transkriptáza a DNA polymeráza, hrajú v procese amplifikácie rozhodujúcu úlohu. Aktivita týchto enzýmov môže byť ovplyvnená faktormi, ako je teplota, pH a prítomnosť inhibítorov. Naše súpravy sú formulované enzýmami vysokej kvality, ktoré boli optimalizované na izotermálnu amplifikáciu. Poskytujeme tiež podrobné pokyny na optimálne reakčné podmienky, aby sme zaistili maximálnu aktivitu enzýmov.
4. Reakčné podmienky
Reakčné podmienky vrátane teploty, času a koncentrácie činidiel môžu ovplyvniť presnosť kvantitatívnej analýzy. Odchýlky od odporúčaných reakčných podmienok môžu viesť k neúplnému zosilneniu alebo k nemu špecifickej amplifikácii. Naše súpravy sa dodávajú s jasnými a podrobnými protokolmi, ktoré špecifikujú optimálne reakčné podmienky pre presné a reprodukovateľné výsledky.
Hodnotenie presnosti našich súprav na izotermickej amplifikácii RNA
Aby sme zabezpečili presnosť našich súprav na izotermálne amplifikáciu RNA, vykonávame prísne testy kontroly kvality. Tieto testy zahŕňajú:
1. Testovanie citlivosti
Testujeme citlivosť našich súprav zosilnením známych množstiev cieľovej RNA. Naše súpravy sú schopné detekovať nízke hladiny RNA, čo je nevyhnutné pre aplikácie, ako je detekcia zriedkavých transkriptov alebo patogénov.
2. Testovanie špecifickosti
Špecifickosť sa testuje zosilnením new - cieľových sekvencií RNA, aby sa zabezpečilo, že neexistuje žiadna ne -špecifická amplifikácia. Naše priméry boli navrhnuté tak, aby mali vysokú špecifickosť, a naše súpravy neustále vykazujú minimálnu ne -špecifickú amplifikáciu.
3. Testovanie reprodukovateľnosti
Reprodukovateľnosť je kľúčovým ukazovateľom presnosti. Vykonávame viac replikátov amplifikačnej reakcie s použitím rovnakej vzorky RNA, aby sme zaistili, že výsledky sú konzistentné. Naše súpravy majú vysokú reprodukovateľnosť, čo znamená, že vedci môžu získať spoľahlivé výsledky v rôznych experimentoch.
Aplikácie našich súprav na izotermické zosilnenie RNA
Naše súpravy na izotermálne zosilnenie RNA majú širokú škálu aplikácií vrátane:
1. Diagnostika choroby
Súpravy sa môžu použiť na detekciu vírusovej a bakteriálnej RNA v klinických vzorkách. Napríklad pri diagnostike infekčných chorôb, našeMira RNA izotermálna rýchla amplifikačná súprava fluorescencia -iimôže poskytnúť rýchle a presné výsledky, čo je rozhodujúce pre včasné ošetrenie.
2. Analýza génovej expresie
Kvantitatívna analýza génovej expresie je dôležitou aplikáciou našich súprav. Vedci môžu použiť naše súpravy na meranie hladín expresie špecifických génov v rôznych tkanivách alebo za rôznych experimentálnych podmienok.
3. Detekcia patogénu
Naše súpravy sú tiež vhodné na detekciu patogénov vo vzorkách životného prostredia. Napríklad pri testovaní bezpečnosti potravín sa detekcia RNA z potravín - prenášajú patogényMIRA RNA izotermálna rýchla amplifikačná súprava BASIC -II.
Záver
Presnosť kvantitatívnej analýzy s použitím súpravy Izotermálnej amplifikácie RNA je ovplyvnená niekoľkými faktormi vrátane kvality vzorky, návrhu primerov, enzýmovej aktivity a reakčných podmienok. Ako dodávateľ sa zaväzujeme poskytovať súpravy vysokej kvality, ktoré ponúkajú presné a reprodukovateľné výsledky. NášMira RNA izotermálna rýchla amplifikačná súprava fluorescencia -iiaMIRA RNA izotermálna rýchla amplifikačná súprava BASIC -IIboli starostlivo vyvinuté a testované tak, aby vyhovovali potrebám výskumných pracovníkov v rôznych oblastiach.
Ak máte záujem dozvedieť sa viac o našich súpravách na izotermálne zosilnenie RNA alebo by ste chceli začať diskusiu o obstarávaní, neváhajte a oslovte. Sme odhodlaní poskytovať vynikajúce výrobky a služby na podporu vašich výskumných úsilia.
Odkazy
- Van Nieuwerburgh F, Leirs H, Huygen K. Technológie izotermálnej amplifikácie nukleových kyselín pre bod - Diagnostika starostlivosti: Kritický prehľad. Clin Chem Lab Med. 2014; 52 (2): 175 - 196.
- Gill P, Ghaemi H. Technológie izotermálnej amplifikácie nukleovej kyseliny: prehľad. Nukleozidy nukleotidy nukleové kyseliny. 2008; 27 (3): 224 - 243.
- Notomi T, Okayama H, Masubuchi H, Yonekawa T, Watanabe K, Amino N, Hase T. Loop - sprostredkovaná izotermálna amplifikácia DNA. Nukleové kyseliny Res. 2000; 28 (12): E63.