Kalibrácia súpravy na detekciu zoonotických chorôb je precízným a rozhodujúcim procesom, ktorý zaisťuje presnosť, spoľahlivosť a reprodukovateľnosť výsledkov testov. Ako dodávateľ súprav na detekciu zoonotických chorôb chápem význam kalibrácie pri udržiavaní kvality našich výrobkov. V tomto blogu vás prevediem krokmi a úvahami spojenými s kalibráciou súpravy na detekciu zoonotických chorôb.
Pochopenie základov súprav na detekciu zoonotických chorôb
Zoonotické choroby sú choroby, ktoré sa môžu prenášať medzi zvieratami a ľuďmi. Detekčné súpravy sú určené na identifikáciu prítomnosti patogénov spojených s týmito chorobami v rôznych vzorkách, ako je krv, moč alebo tkanivo. Tieto súpravy zvyčajne používajú techniky, ako je polymerázová reťazová reakcia (PCR), enzýmový imunosorbentný test (ELISA) alebo metódy založené na fluorescencii.
Presnosť detekčnej súpravy je nevyhnutná, pretože nesprávne diagnostika môže mať vážne následky vrátane šírenia chorôb a nevhodnej liečby. Kalibrácia je proces nastavovania a overenia súpravy, aby sa zabezpečilo, že poskytuje konzistentné a presné výsledky.
Pred - kalibračné prípravy
Pred začatím procesu kalibrácie je nevyhnutné zhromaždiť všetky potrebné materiály a vybavenie. To zahŕňa referenčné normy, ktoré sú vzorkami so známymi koncentráciami cieľového patogénu. Tieto normy sa používajú na vytvorenie kalibračnej krivky, ktorá je grafickým znázornením vzťahu medzi nameraným signálom (ako je intenzita fluorescencie alebo absorbancia) a koncentráciou patogénu.
Napríklad, ak používame detekčnú súpravu založenú na fluorescencii akoMira brucella fluorescencia Detekcia súprava iba používa, musíme mať referenčné štandardy Brucella s rôznymi známymi koncentráciami. Ďalej potrebujeme vhodný prístroj na meranie signálu, napríklad čítačku fluorescencie.
Je tiež dôležité zabezpečiť, aby bolo pracovné prostredie čisté a bez kontaminantov. Akákoľvek kontaminácia môže ovplyvniť presnosť kalibrácie a následné výsledky testov. Teplota a vlhkosť životného prostredia by mali byť v určenom rozsahu, aby súpravy fungovali optimálne.
Krok - podľa procesu kalibrácie kroku
1. Príprava referenčných štandardov
Prvým krokom v kalibrácii je pripraviť sériu referenčných štandardov s rôznymi koncentráciami cieľového patogénu. Tieto normy by mali pokrývať očakávaný rozsah koncentrácií patogénov vo vzorkách reálneho sveta. Napríklad, ak je detekčná súprava navrhnutá na detekciu toxoplasma gondii, môžeme použiťMIRA TOXOPLASMA GONDII DETECENCIA DETECTION SILU VÝSKUMU POUŽITIEa pripravte referenčné štandardy toxoplasma gondii pri nízkych, stredných a vysokých koncentráciách.
Referenčné normy by sa mali pripraviť opatrne, aby sa zabezpečila ich presnosť. To môže zahŕňať riedenie zásobného roztoku patogénu pomocou vhodného riedidla. Riedenie by malo byť kompatibilné s detekčnou súpravou a nemalo by interferovať s detekčným procesom.
2. Spustenie kalibračných vzoriek
Akonáhle sú referenčné normy pripravené, prechádzajú detekčnou súpravou podľa pokynov výrobcu. Zvyčajne to zahŕňa pridanie vzoriek do vhodných jamiek v mikroplate, pridanie potrebných činidiel a inkubáciu doštičky na stanovené obdobie.
Počas inkubácie reagenty v súprave reagujú s cieľovým patogénom vo vzorkách, čo produkuje merateľný signál. Pre fluorescenčné súpravy je tento signál zvyčajne intenzita fluorescencie. Prístroj použitý na meranie signálu by mal byť správne kalibrovaný a udržiavaný, aby sa zabezpečilo presné hodnoty.
3. Vytváranie kalibračnej krivky
Po spustení kalibračných vzoriek sa namerané signály vynesú proti známym koncentráciám referenčných štandardov. Tým sa vytvára kalibračná krivka, ktorá je zvyčajne lineárny alebo ne -lineárny vzťah v závislosti od metódy detekcie.
Kalibračná krivka sa používa na stanovenie koncentrácie patogénu v neznámych vzorkách. Meraním signálu neznámeho vzorky a porovnaním jej kalibračnej krivky môžeme odhadnúť koncentráciu patogénu v tejto vzorke.
4. Vyhodnotenie kalibračnej krivky
Po vytvorení kalibračnej krivky je dôležité vyhodnotiť jej kvalitu. To zahŕňa hodnotenie linearity, presnosti a presnosti krivky. Linearita krivky sa dá určiť výpočtom korelačného koeficientu (hodnota R2). Vysoká hodnota R2 (takmer 1) označuje dobrý lineárny vzťah medzi signálom a koncentráciou.
Presnosť kalibračnej krivky sa dá vyhodnotiť porovnaním nameraných koncentrácií referenčných štandardov s ich známymi koncentráciami. Presnosť krivky sa môže hodnotiť opakovaním kalibračného procesu viackrát a výpočtom koeficientu variácie (CV) nameraných signálov.
5. Nastavenie parametrov súpravy (v prípade potreby)
Ak kalibračná krivka nespĺňa požadované kritériá kvality, možno bude potrebné vykonať úpravy parametrov súpravy. To by mohlo zahŕňať úpravu reakčného času, koncentráciu reagencií alebo nastavenia prístroja.
Napríklad, ak je fluorescenčný signál príliš nízky, možno budeme musieť zvýšiť čas inkubácie alebo koncentráciu fluorescenčného farbiva v súprave. Po vykonaní úprav by sa proces kalibrácie mal opakovať, kým kalibračná krivka nespĺňa kritériá kvality.
Kontrola kvality a validácia
Kalibrácia nie je jedným časovým procesom. Je dôležité vykonávať pravidelné kontroly kvality, aby sa zabezpečilo, že súprava naďalej poskytuje presné výsledky. Zahŕňa to vzorky riadenia behu so známymi koncentráciami patogénu spolu s neznámymi vzorkami v každom testovacom behu.
Výsledky kontrolných vzoriek by mali spadať do prijateľného rozsahu. Ak sú výsledky kontrolných vzoriek mimo prijateľného rozsahu, môže to naznačovať problém so súpravou, prístrojom alebo testovacím postupom. V takýchto prípadoch bude možno potrebné opakovať kalibračný proces alebo je potrebné vymeniť súpravu.
Validácia je ďalším dôležitým aspektom zabezpečenia presnosti detekčnej súpravy. Validácia zahŕňa testovanie súpravy s veľkým počtom vzoriek skutočného sveta a porovnanie výsledkov so štandardnou metódou zlata. To pomáha potvrdiť, že súprava dokáže presne zistiť patogén v rôznych typoch vzoriek a za rôznych podmienok.
Dôležitosť kalibrácie pri detekcii zoonotických chorôb
Kalibrácia je rozhodujúca pri detekcii zoonotických chorôb z niekoľkých dôvodov. Po prvé, zabezpečuje presnosť výsledkov testov, čo je nevyhnutné na prijímanie informovaných rozhodnutí o diagnostike a liečbe chorôb. Nepresné výsledky testov môžu viesť k nesprávnej diagnóze, ktorá môže mať za následok oneskorenú liečbu, šírenie choroby a zbytočné použitie antibiotík alebo iných liekov.
Po druhé, kalibrácia pomáha udržiavať reprodukovateľnosť výsledkov testu. To znamená, že rôzni používatelia súpravy v rôznych laboratóriách by mali získať podobné výsledky pri testovaní rovnakých vzoriek. Reprodukovateľnosť je dôležitá pre porovnanie údajov v rôznych štúdiách a na zabezpečenie spoľahlivosti súpravy v aplikáciách v reálnom svete.
Nakoniec regulačné agentúry vyžadujú kalibráciu, aby sa zabezpečila kvalita a bezpečnosť zdravotníckych pomôcok vrátane súprav na detekciu zoonotických chorôb. Dodržiavanie regulačných požiadaviek je nevyhnutné na prijatie a používanie súpravy v klinickom a výskumnom prostredí.
Záver
Kalibrácia súpravy na detekciu zoonotických chorôb je komplexný, ale základný proces, ktorý zaisťuje presnosť, spoľahlivosť a reprodukovateľnosť výsledkov testov. Ako dodávateľ súprav na detekciu zoonotických chorôb sa zaväzujeme poskytovať produkty vysokej kvality, ktoré sú správne kalibrované a overené.
Ak máte záujem o nákup našich súprav na detekciu zoonotických chorôb alebo máte akékoľvek otázky týkajúce sa kalibrácie alebo našich produktov, neváhajte nás kontaktovať a požiadajte o ďalšie informácie a začnite diskusiu o obstarávaní.
Odkazy
- Kutz, SJ, Dewey, CE a Jenkins, EJ (2012). Zoonózy: Infekčné choroby prenosné zo zvierat na ľudí. Wiley - Blackwell.
- Peiris, JSM, Guan, Y., & Markwell, D. (2007). Vojnatá chrípka. The Lancet, 370 (9587), 1615 - 1626.
- Centrá pre kontrolu a prevenciu chorôb. (2023). Zoonotické choroby. Zdroj: [Webová stránka CDC].